ph接近等电点蛋白质会怎么样?
蛋白质的等电点(pI)是指蛋白质在特定pH值下带有净电荷为零的状态,即正电荷和负电荷的数量相等。在等电点附近,蛋白质的溶解度通常最低,因为蛋白质分子之间的电荷排斥最小,这使得蛋白质更容易聚集和沉淀。
当pH接近蛋白质的等电点时,会出现以下现象:
1. 电泳速度减慢:在电泳过程中,蛋白质通常因为带有电荷而向相反电荷的电极移动。当pH接近等电点时,蛋白质的电荷减少,导致电泳速度减慢,最终在等电点时蛋白质几乎不移动。
2. 溶解度降低:蛋白质的溶解度与其电荷状态密切相关。在等电点附近,蛋白质的溶解度最低,因为它们失去了水合层,这使得蛋白质更容易发生非特异性相互作用,如聚集、絮凝或沉淀。
3. 吸附现象:蛋白质在等电点附近可能更容易吸附到固体表面,如实验室容器壁或过滤材料上。
4. 分子间作用力改变:在等电点附近,蛋白质的疏水相互作用和范德华力等非电荷相互作用可能变得更加显著,这可能会影响蛋白质的构象和功能。
5. 功能活性变化:蛋白质的功能通常与其三维结构密切相关,而蛋白质的结构受到pH值的影响。因此,当pH接近等电点时,蛋白质的功能活性可能会发生变化。
在生物技术和制药行业中,了解蛋白质的等电点对于蛋白质的纯化、稳定性和配方设计非常重要。通常,蛋白质在远离其等电点的pH值下进行处理和储存,以保持其溶解度和活性。
解释氨基酸的等电点?
氨基酸的等电点(isoelectricpoint):氨基酸的等电点在一定pH条件下,某种氨基酸接受或给出质子的程度相等,分子所带的净电荷为零,此时溶液的pH值就称为该氨基酸的等电点(pI)?公式: pH=(pKn+pKn+1)/2氨基酸等电点表:甘氨酸5.97丙氨酸6.00缬氨酸5.96亮氨酸5.98异亮氨酸6.02苯丙氨酸5.48丝氨酸5.68苏氨酸6.16酪氨酸5.66半胱氨酸5.05蛋氨酸5.74脯氨酸6.30色氨酸5.89赖氨酸9.74精氨酸10.76组氨酸7.59天冬氨酸2.77谷氨酸3.22天冬酰胺5.41谷氨酰胺5.65
如何确定蛋白质等电点
由于蛋白质表面离子化侧链的存在,蛋白质带净电荷。由于这些侧链都是可以滴定的(titratable),对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点。
在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从而有利于悬浮液的过滤。在等电点外的所有其他pH值,依据蛋白质所带净电荷采用电泳和离子交换层析来分离和分离纯化该蛋白质。
等电点沉淀主要应用于蛋白质等两性电解质的分离提纯,还可应用于大豆异黄酮的分离:用等电点沉淀法脱去蛋白质,可提高异黄酮制品的纯度,异黄酮截留率为7。2%,蛋白质截留率为91。1%。
各种蛋白质的等电点不同是由于
各种蛋白质的等电点不同是由于分子量大小不同。蛋白质溶液处于某一pH溶液时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
等电点是两性电解质所带电荷因溶液的pH值不同而改变,当两性电解质正负电荷数值相等时,溶液的pH值即称为该物质的等电点。
在等电点时蛋白质为什么容易沉淀
由于蛋白质在等电点时净电荷为零,减少了分子间的静电斥力,因而容易而沉淀,此时溶解度最小。蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。一般说,蛋白质约占人体全部质量的18%,最重要的还是其与生命现象有关。
蛋白质(protein)是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%-20%,即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6-12kg。人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由20种氨基酸(Aminoacid)按不同比例组合而成的,并在体内不断进行代谢与更新。