什么是LB培养基?
LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。也可用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)。 扩展资料
可分为液体培养基和固体培养基。LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的’培养基。而LB培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。两者都属于半合成培养基。肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。而LB培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl。高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。
LB培养基的配方?
配方:
胰蛋白胨(tryptone)10g
酵母提取物(yeast extract)5g
氯化钠(NaCl)10g
固体培养基另加 琼脂粉 15-20g
加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min
LB培养基,是微生物学实验中常用的培养基,用于培养大肠杆菌等细菌,其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。
不同盐浓度的LB培养基如何配制?
实验步骤
1. LB 培养基
Tryptone
10 g
Yeast Extract
5 g
NaCl
10 g
加水至 1000 mL(pH 7.2,固体培养基加 1.8% 琼脂粉)。
2. LB 抗性筛选培养基
待灭菌后的 LB 固体培养基温度降至 50℃左右,加入抗生素储存液至终浓度 50 μg/mL,即每毫升培养基加抗生素储存液 1 μL,摇匀后,倒平板。
液体 LB 抗性筛选培养基,在完全冷却后加入抗生素,加入的量与固体培养基相同。
3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培养基
在含 100 μg/mL Amp 的 LB 琼脂平板上加入 40 μL X-gal 贮存液和 40 μL IPTG 溶液,用无菌玻璃涂布器把溶液均匀涂布于整个平板表面,超净工作台上吹干后备用。
4. SOC 液体培养基
Tryptone
20 g
Yeast Extract
5 g
NaCl
0.5 g
加入 950 mL 水,完全溶解后加入 250 mmol/L 的 KCl 溶液 10 mL,用NaOH 溶液(5 mmol/L)调节 pH 值至 7.0,双蒸水定容至 1000 mL 后高压灭菌。灭菌后降温至 60℃以下,加入 7.2 mL 50% 葡萄糖溶液。使用前加入5 mL 经灭菌的 2 mol/L 的 MgCl2溶液。
lb固体培养基配方?
LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。
LB固体培养基倒板
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
LB液体培养基是什么?
LB液体培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求,培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌,通过培养工程菌,可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。
LB培养基是一种近年来用于培养基因工程受体菌即大肠杆菌的常用培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼的说法,这个名字来源于溶菌肉汤。
lb培养基的配制步骤?
LB培养基的配制方法:
(1)称量:分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。
(2)溶化:加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。
(3)调节pH:用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。
(4)定容:将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
(5)加琼脂:加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
(6)分装、加塞、包扎。
(7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌约20min。
lb培养基配方?
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L;
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L;
氯化钠(NaCl) 10g/L;
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4,LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求,可分为液体培养基和固体培养基。
lb肉汤培养基是什么?
lb肉汤培养基其实就是lb液体培养基。
LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。也可用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)。可分为液体培养基和固体培养基,配置方法是相同的,固态培养基需要加入琼脂固化。
LB培养基配方:
在950毫升纯水中加入
胰蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质溶解,用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1升。在15大气压下蒸汽灭菌21分钟。
培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌,通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。
lb培养基的配方及制作过程?
LB培养基的配制:
1.成分
胰蛋白胨(tryptone)10g
酵母提取物(yeast extract)5g
氯化钠(NaCl)10g
固体培养基另加 琼脂粉 15-20g
加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min
2.配制方法
①称量 分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。
②溶化 加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。
③调pH 用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。
④定容 将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
⑤加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
⑥分装、加塞、包扎。
⑦高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。